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離心機(jī)是蛋白表達(dá)通關(guān)裝備之一想要通關(guān)蛋白表達(dá)少不了離心機(jī)。常言道細(xì)節(jié)決定成敗,尤其像蛋白表達(dá)提純這樣復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)。一個操作上的小失誤,可能直接影響最終結(jié)果。
雖然可以大致分為三步,表達(dá)、分離、純化,但是這個過程十分繁瑣。 蛋白表達(dá)前期還有一系列復(fù)雜過程,耗費(fèi)時間也長,到最后一步,還不能放松警惕。 蛋白進(jìn)行純化是通關(guān)的最后一步,選擇合適的純化方法,可以提高蛋白的純化效率,讓蛋白純化簡單便捷。常用的方法有:親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析、疏水層析等。 親和層析 親和層析純化是利用生物大分子物質(zhì)具有與某些相應(yīng)的分子專一性可逆結(jié)合的特性進(jìn)行蛋白純化的技術(shù)。 離子交換層析
離子交換層析是一種依據(jù)蛋白表面所帶電荷量不同進(jìn)行蛋白分離純化的技術(shù)。
凝膠過濾層析
凝膠過濾(也叫排阻層析或分子篩)是一種根據(jù)分子大小從混合物中分離蛋白質(zhì)的方法。
疏水作用層析
疏水作用層析是利用鹽-水體系中樣品分子的疏水基團(tuán)和層析介質(zhì)的疏水配基之間疏水力的不同而進(jìn)行分離的一種層析方法。
雖然方法多種多樣,但是,都需要用離心機(jī)來進(jìn)行分離純化。 |